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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠食管成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

小鼠食管成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MSI2蛋白抗體 GTP酶IMAP家族成員7抗體 泛素結(jié)合酶E2J1抗體 小鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞 大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 MEF小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;HEK293T-COGFP-PURO

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問(wèn)量:1412

更新時(shí)間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠食管成纖維細(xì)胞

小鼠食管成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

食管

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7918

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠食管成纖維分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長(zhǎng)和心肺的下降,而逐漸增長(zhǎng)。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過(guò)膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過(guò)程中,食管的上皮細(xì)胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。食管的外膜,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,富有血管、淋巴管及神經(jīng)。主要包含食管成纖維細(xì)胞,成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、bFGFInsulin、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠食管成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠食管成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠食管成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β2(mouse TGF-β2)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠可溶性粒細(xì)胞靶受體(mouse sEM-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠端粒酶(mouse Telomerase)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)試劑盒 96T/48T

Human soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒

HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISAKit 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor12-HETE(Human20-hydroxyeicosateaenoicacid)ELISAKit12羥二十烷四烯酸

飲料檸檬酸比色法定量試劑盒20

MouseLactoferrin,LTF/LFELISAKit小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

ZC3H7B蛋白抗體

PE-Cy5標(biāo)記小鼠Ly-6G/Ly-6C單克隆抗體

NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)

NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白

NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein

小鼠食管成纖維細(xì)胞大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)試劑盒 ,英文名: PYY ELISA Kit

Porcine hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 豬輕化1(HYD)試劑盒

動(dòng)物源性成分(18S)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforLy6a(Humanlymphocyteaigen6complexlocusA)ELISAKit人淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A

體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量試劑盒50

ELISAKitNO雞血清

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行



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